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Hypoxyprobe 缺氧探针检测试剂盒
点击次数:450 发布时间:2018-07-13

Hypoxyprobe 缺氧探针检测试剂盒

 
Hypoxyprobe, Inc.
(缺氧探针公司)是一家致力于为氧代谢紊乱引起的恶性和正常组织疾病提供诊断和治疗工具的小公司。位于美国马塞诸萨州伯灵顿(121 Middlesex Turnpike, Burlington, Massachusetts, USA 01803),属于美国国际天然药物公司(Natural Pharmacia International, Inc.NPI)缺氧探针部门的衍生公司。 Hypoxyprobe, Inc.(缺氧探针公司)的成立起源于James Raleigh教授(任职于查珀尔希尔(Chapel Hill)北卡罗莱纳大学放射肿瘤学部门)和NPI(当时位于北卡罗莱纳Research Triangle Park)之间的合作。起初的合作着重于肿瘤缺氧的临床研究。NPI大规模生产缺氧探针Pimonidazole HCl,而James Raleigh教授提供保护的抗体,特异性检测人肿瘤上结合Pimonidazole的缺氧细胞。
总体来说,使用Pimonidazole HCl作为缺氧标记物,用在狗、大小鼠上的临床前研究越来越受科研圈的关注。2002NPI授权五年给Chemicon公司销售缺氧探针试剂用于动物研究。2006年预测到市场对缺氧探针试剂的扩张需求,NPI终止chemicon授权并成立Hypoxyprobe, Inc.(缺氧探针公司)以开发更且更宽广的试剂用于动物和临床研究。
  如今的Hypoxyprobe, Inc.(缺氧探针公司)专注于研发非侵略性的缺氧标志物(Hypoxia maker)和缺氧依赖性的细胞因子,所有产品皆基于Pimonidazole核心结构来开发。
特色产品
HypoxyprobeTM-1 Kit 缺氧探针检测试剂盒
关键词
Hypoxyprobe, Inc.(缺氧探针公司);Pimonidazole HCl;缺氧标志物(Hypoxia maker);Chemicon Inc. 
产品应用: 
免疫化学法检测细胞和组织缺氧情况,包括免疫荧光(IF),免疫过氧化物酶,WB或流式细胞分析(FC);
试剂盒组分

编号       

组分

                       货号(规格)

保存方法                      

HP1-100Kit   

HP1-200Kit    

HP1-1000Kit    

1

Pimonidazole HCl

100mg

200mg

1000mg

室温或2-8避光

2

4.3.11.3 mouse MAb

1ml

1ml

1ml

-20,避免反复冻融

试剂盒组分详细描述: 
一、Hypoxyprobe-1 
Hypoxyprobe-12-硝基咪唑的替代物,其化学名和成分是Pimonidazole hydrochloridePimonidazole HCl),分子量为290.8,水溶性为400mM=116 mg/ml),紫外吸收(324nm)的吸光系数为70200.9%生理盐水)。
Hypoxyprobe-1的粉末和溶液形式皆具化学稳定性。比如,固体形式的Hypoxyprobe-1于柔弱光线下室温保存2年,UVHPLC分析法评估无任何降解发生。溶于0.9%生理盐水的Hypoxyprobe-1,浓度100g/L置于2-8保存4.5年,UVHPLC分析法评估无任何降解发生。
作用机理:缺氧细胞中Pimonidazole被还原后得以活化。这一活化的中间物与蛋白质、多肽和氨基酸中的巯基基团(thiol groups)形成稳定的加合物。Mab1抗体结合这些加合物从而能借由免疫化学法来检测。
二、MAb1抗体 
MAb1是小鼠IgG1单克隆抗体(克隆4.3.11.3),为杂交瘤细胞克隆4.3.11.3表达液过滤除菌后得到的上清液,含60μg/ml MAb10.15%叠氮钠。
感兴趣组织可用免疫组化检测(IHC),冰冻切片或者福尔马林固定的石蜡包埋切片;也可组织降解后用流式分析法检测;或用WB检测。典型情况下,MAb1抗体经1:50稀释后,取100μl到组织切片上。然后加合适的二抗方法来检测Pimonidazole加合物。
使用指南: 
1 Animal Studies 动物研究 
研究正常或肿瘤组织缺氧首先通过静脉注射(intravenous infusion)、腹腔注射(intraperitoneal injection)或口服(oral ingestion)法给Hypoxyprobe-1溶液,剂量为60mg/kg体重。比如,25g小鼠的探针用量为1.5mg/只小鼠。(高达400mg/kg的剂量用于小鼠无可见毒性或引起组织缺氧变化,但60mg/kg以低成本给予良好的染色结果)。
给药后,Hypoxyprobe-1分布到包括大脑的所有组织,且仅仅在氧浓度≤14μM(相当于pO2=10mm Hg37)的细胞内与蛋白质巯基形成加合物。除了肿瘤之外,正常组织如肝脏、肾脏和皮肤含pO2等于或低于10mm Hg的细胞,也会结合Hypoxyprobe-1
2Tissue cultures 组织培养 
通常情况下,细胞悬液置于含100-200μM Hypoxyprobe-1的缺氧环境中孵育1-2h。之后细胞离心涂片、固定、MAb1和显色或荧光二抗染色。

货号              

名称                                                                                                                    

HP1-100Kit

Hypoxyprobe Kit (100 mg pimonidazole HCl plus 1.0 ml of 4.3.11.3 mouse MAb)

HP1-200Kit

Hypoxyprobe Kit (200 mg pimonidazole HCl plus 1.0 ml of 4.3.11.3 mouse Mab)

HP1-1000Kit

Hypoxyprobe Kit (1000 mg pimonidazole HCl plus 2 x 1.0 ml of 4.3.11.3 mouse MAb)


 

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